下列是产品的订购信息:
产品名称
|
规格
|
型号
|
HTR-8/Svneo (人绒毛膜滋养层细胞)
|
1×10?cells/T25培养瓶
|
GOY-01X0585
|
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养方法:
1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;
③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;
⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏:
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;
④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
培养操作:
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)?;灰翰?检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
硬脂铅 质量规格:>99%,BR,用于细胞培养,药剂造模 Paclitaxel
硬脂钠(>95%,BR) 质量规格:HPLC>98%,标准品 Paclitaxel
硬脂镁 质量规格:>98.5%,BR,可用于细胞培养 Palonosetron HCl
硬脂铝 质量规格:≥675 U/mg,USP28 Paromomycin Sulfate
硬脂(>98%,BR) 质量规格:含量测定 Paromomycin Sulfate
硬脂钾(>98%,BR) 质量规格:≥98%,BR Pazufloxacin Mesilate
硬脂酯(>99.5%(GC),标准物质) 质量规格:HPLC>98%,标准品 Pazufloxacin Mesilate
硬脂红 质量规格:≥99.0% ,水合物 Pefloxacin mesylate dihydrate
硬脂钙 质量规格:HPLC>98%,标准品 Pefloxacin mesylate dihydrate
硬脂酯(>98%,BR) 质量规格:>99%,BR,水合物 Pemetrexed Disodium
DNA电泳分子量标准 (50400)BJ5183 E.coli Strain100g
DNA电泳分子量标准 (3005000)BL21 (DE3) Competent Cell100g
DNA电泳分子量标准(λ DNA/HindIII)BL21 (DE3) pLysS Competent Cell100g
DNA电泳分子量标准(pBR322/MspI)BL21 E.coli Strain100g
DNA电泳分子量标准(pUC19/MspI)BL21 SI E.coli Strain100g
DNA电泳分子量标准(λDNA/EcoR I)BL21(AI) E.coli Strain100g
DNA电泳分子量标准(λDNA/BstE II)BL21(DE3) E.coli Strain100g
DNA电泳分子量标准(λDNA/EcoR I+ Hind III)BL21(DE3)plysS E.coli Strain100g
DNA电泳分子量标准(pBR322/BstN I)BL21CodonPlusRIL E.coli Strain100g
DNA电泳分子量标准(φX174 DNA/HaeⅢ)BL21CodonPlusRP E.coli Strain100g
DNA电泳分子量标准(φX174 DNA/Hinc Ⅱ)Bleomycin Solution100g
Southern专用DNA Marker(生物素)Blocking Reagent with Triton X100 & Fetal Calf Serum 100g
Southern专用DNA Marker(DIG)Blocking Reagent with Triton X100 & Sheep Serum100g
Southern Marker DL2000(生物素)Blood Clot DNAOUT100g
Southern Marker DL2000(DIG)Blood Clot DNAOUT100g
羟基喜树碱 (20S)10羟基喜树碱 (S)10羟基喜树碱 (S)4乙基4,9二羟基1H喃并3',4':6,7吲嗪并1,2B3,14(4H,12H)二备注:
5,7二羟基4'氧基异黄 491805
5,7Dihydrox 4'methoxyisoflavone 特价促销 分子式:C16H12O5 分子量:284.26
5,7二羟基3(4氧基)4H1并喃4 鹰嘴豆黄素 A(5,7二羟基4′氧基异黄) 鸡豆黄素A 生原禅宁,A5,7二羟基4’氧基异黄 鹰嘴豆芽素A 拜查林备注:
荷叶碱 475832
Nuciferine 特价促销 分子式:C19H21NO2 分子量:295.38
1,2二氧基6基5,6,6A,7四氢4H二并DE,G 荷叶碱提取物备注:
橙黄决明素 67979253
Aurantioobtusin 特价促销 分子式:C17H14O7 分子量:330.291
1,3,7三羟基2,8二氧基6基蒽9,10二备注:
光甘草定 59870687
HTR-8/Svneo (人绒毛膜滋养层细胞)体液赖氨酸(lysine)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒 20次
盐析法大量蛋白浓缩沉淀试剂盒 5/10次
细胞色素P450亚酶CYP1A2(MROD)活性荧光定量检测试剂盒 20次
北方杂交完全试剂盒
细胞内钙离子水平动态变化荧光检测试剂盒 20次
通用型总淀粉生物酶比色法定量检测试剂盒 20次
饮料甘素(dulcin)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒 20次
细胞PAR-2蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒 10/20次
溴酚蓝(BROMPHENOL BLUE)溶液(100毫克/毫升)10毫升
通用型鸭鼠伤寒沙门氏(ST)基因检测试剂盒 20次
酵母细胞周期S后期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒 10次
寡核苷酸探针非同位素AP-BCIP/NBT法DNA南方杂交完全试剂盒 5次