细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备F-12K培养基;胎牛血清,10%;双抗,1%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
公司细胞现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
产品名称
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规格
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型号
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SW480 [SW-480] (人结肠癌细胞)
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1×10?cells/T25培养瓶
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GOY-01X0222
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冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验事项:
1. 试剂准备:所有试剂都必须在使用前达到室温,使用后请立即按照说明书要求保存试剂。 实验操作中请使用一次性的吸头,避免交叉污染。
2. 加样:加样或加试剂时,请注意在吸取标本 / 标准品,酶结合物或底物时,前一个孔与后一个孔加样之间的时间间隔如果太大,将会导致不同的“预孵育"时间,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品)好控制在10分钟内,如标本数量多,推荐使用多道移液器加样。
3. 孵育:为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜,以避免液体蒸发;洗板后应尽快进行下步操作,任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。
4. 洗涤:洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干,勿将滤纸直接放入反应孔中吸水,同时要消除板底残留的液体和手指印,避免影响后的酶标仪读数。
5. 试剂配制:Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理,以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用,并使用相应的稀释液配制,不能混淆。请确配置标准品及工作液,尽量不要微量配置(如吸取检测溶液A时,一次不要小于10μl),以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差;请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。
6. 反应时间的控制:加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如,每隔10分钟),如颜色较深,请提前加入终止液终止反应,避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。
7. 底物:底物请避光保存,在储存和温育时避免强光直接照射。
建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。
如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请后乘以稀释倍数。
质量规格:2040目,气相、液相色谱柱专用Manganeseacetatetetrahydrate
质量规格:4060目,气相、液相色谱柱专用Manganesecarbonate
质量规格:6080目,气相、液相色谱柱专用Manganesenitratesolution
质量规格:80100目,气相、液相色谱柱专用BenzylmagnesiumBromide
质量规格:干燥剂用Magnesiumbromide
质量规格:pellets,35mmMagnesiumperchloratehexahydrate
质量规格:pellets,23mmMagnesiumbromidehexahydrate
质量规格:2040目,气相、液相色谱柱专用Magnesiumethoxide
质量规格:6080目,气相、液相色谱柱专用anhydrousmagnesiumperchlorate
质量规格:80100目,气相、液相色谱柱专用EDTA—disodiummagnesiumsalt,≥98%
质量规格:2mm3mm,干燥剂用Magnesiumcarbonatebasic
质量规格:beads,48meshMagnesiumsulfateanhydrous
质量规格:beads,812meshMagnesiumnitratehexahydrate
质量规格:2040目,气相、液相色谱柱专用Magnesiumstearate
质量规格:4060目,气相、液相色谱柱专用Magnesiumhydroxide,≥95.0%
;纯品型;标准品;有证书 22224926 特价促销 规格: 0.1g
环唑;纯品型;标准品;有证书 119446683 特价促销 规格: 0.25g
4酰氨比林对照品;有报告 83158 特价促销 规格: 100mg
鸟嘌呤核苷(鸟甙);纯品型;标准品;有证 118003 特价促销 规格: 0.1g
丙钙;纯品型;标准品;有证书 4075814 特价促销 规格: 0.1g
3β酰齐墩果 特价促销 规格: HPLC≥98%;20mg
慈溪麦冬皂苷A 288143271 特价促销 规格: HPLC≥98%;20mg
羟酪醋 69039027 特价促销 规格: HPLC≥98%;20mg
木犀草素7O新橙皮糖苷 特价促销 规格: HPLC≥98%;20mg
DRF1042 200619132 特价促销 规格: HPLC≥98%;20mg
丹皮钠 64653 特价促销 规格: HPLC≥98%;20mg
异酰紫草素 52438127 特价促销 规格: HPLC≥98%;20mg
羽扇 1617705 特价促销 规格: HPLC≥98%;20mg
乌美司 58970766 特价促销 规格: HPLC≥98%;100mg
石杉碱 103548829 特价促销 规格: HPLC≥98%;20mg
SW480 [SW-480] (人结肠癌细胞) UBE2O/E2 230K 泛素结合酶E2O抗体 规格: 0.2ml
phospho-GluR1(Ser849) 磷酸化谷氨酸受体1抗体 规格: 0.1ml
PAK1 p21激活激酶1抗体 规格: 0.1ml
IL-18/IGIF 白细胞介素-18/干扰素γ诱导因子抗体 规格: 0.1ml
GLMN/FK506 binding protein associated protein FK506结合蛋白相关蛋白抗体(他克莫司相关蛋白) 规格: 0.2ml
IFN gamma(F2E4) γ-干扰素单克隆抗体 规格: 0.1ml
GADD45GIP1 GADD45γ相互作用蛋白1抗体 规格: 0.2ml
KLKB1/Plasma Kallikrein 1B 浆激肽释放酶抗体 规格: 0.2ml
Phospho-BRCA1(Ser1189) 磷酸化易基因1抗体 规格: 0.1ml
Rabbit Anti-Bovine IgM/Cy5.5 Cy5.5标记的兔抗牛IgM 规格: 0.1ml