下列是产品的订购信息:
产品名称
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规格
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型号
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4T1 (小鼠乳腺癌细胞)
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1×10?cells/T25培养瓶
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GOY-01X0007
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细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养方法:
1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;
③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;
⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏:
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;
④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
培养操作:
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
2(6氨基9H嘌呤9yl)乙d4Thiazolyl Blue Tetrazolium Bromide (ce...100MG染色剂
N6(δ2异基)腺嘌呤Methyl Red (pH indicator, pH 4.4 to 6.0)5G染色剂
9(2',3',5'三氧基甲基βD阿糖)腺嘌呤Methyl Green (Dye content, ≥85%)1G染色剂
红9(2羟基3壬基)腺嘌呤盐盐Methylene blue (Dye content, ≥82%)10G染色剂
2氟腺嘌呤Hematoxylin (certified by the Biologic...5G染色剂
代烟酰腺嘌呤二核苷盐Giemsa stain (for use as a blood stain)1G染色剂
烟腺嘌呤二核苷盐Fluorescamine (≥98%, TLC, powder)100MG染色剂
烟腺嘌呤二核苷盐Fluorescein diacetate (for fluorescenc...1G染色剂
α烟酰腺嘌呤二核苷Toluidine Blue (Standard Fluka, for mi...5G染色剂
NAD+, 盐Fast Green FCF (≥95%, certified by bi...5G染色剂
9甲基d3腺嘌呤Fast Blue RR Salt (≥90%, crystalline)5G染色剂
β烟酰腺嘌呤二核苷, 缩减环已基铵盐Fast Blue BB Salt hemi(zinc chloride) ...1G染色剂
β烟酰腺嘌呤二核苷,缩减二盐Evans Blue (Dye content, ≥75%)1G染色剂
α烟酰腺嘌呤二核苷,缩减二盐Ethidium bromide (for fluorescence, ≥...1G染色剂
βNADP二醛Ethidium bromide solution (500 μg/mL ...5ML染色剂
现货供应 EGFR ,EGFR,Epidermal Growth Factor Receptor,ERBB,ERBB1,ERBB1,Erythroblastic Leukemia viral (verbb) oncogene homolog EGFR抗体
现货供应 EFHD1 Polyclonal EF手性域家族成员D1
现货供应 EFHD1 Monoclonal EF手性域家族成员D1
现货供应 EF1 α1/2 (Acetyl Lys41) Polyclonal EF1 α1/2 (Acetyl Lys41)
现货供应 EED (NT) (Embryonic ectoderm development, HEED, Polycomb protein EED, WAIT1, WAIT1, WD protein associating with integrin cytoplasmic tails 1) EED抗体(N末端)
现货供应 EDEM3 (Alpha1, 2mannosidase EDEM3 ) EDEM3抗体
现货供应 EDEM2 (ER degradationenhancing alphamannosidaselike protein 2) EDEM2抗体
现货供应 EDEM1 (ER degradationenhancing alphamannosidaselike protein 1 ) EDEM1抗体
现货供应 ECM ,ECM1,extracellular matrix protein,extracellular matrix protein 1 ECM抗体
现货供应 AntiECFPTag Monoclonal (6B11), HRP Conjugated ECFPTag(6B11), HRP偶联
4T1 (小鼠乳腺癌细胞) DUT 脱氧尿苷三磷酸酶DUT抗体 规格: 0.1mlLck/p56-LCK **细胞特异性蛋白酪氨酸激酶抗体 规格: 0.2ml
Donkey Anti-rabbit IgG/APC APC标记的驴抗兔IgG 规格: 0.1mlGoat Anti-human IgM/RBITC 罗丹明标记的羊抗人IgM 规格: 0.3ml
SPHK1 鞘氨醇激酶1抗体 规格: 0.2mlRabbit Anti-Goat IgM/Cy3 Cy3标记的兔抗羊IgM 规格: 0.1ml
GIPC-2 胞浆区相关蛋白GIPC2抗体 规格: 0.2mlphospho-Tau protein(Ser422) 磷酸化微管相关蛋白抗体 规格: 0.1ml
MYH7 肌球蛋白重链7抗体 规格: 0.2mlCullin 5/CUL5 管加压素激活钙启动受体蛋白1抗体 规格: 0.2ml
UQCRFS1 质子梯度调节蛋白1抗体 规格: 0.2mlRabbit Anti-rat IgM/Cy3 Cy3标记的兔抗大鼠IgM 规格: 0.1ml
PAX8 配对盒基因8抗体 规格: 0.1mlPhospho-SHIP1 (Tyr1020) 磷酸化SH2结构含磷酸肌醇SHIP1抗体 规格: 0.1ml
FAM153B FAM153B蛋白抗体 规格: 0.2mlphospho-BACH1/BRIP1(Ser990) 磷酸化易基因相互作用蛋白1抗体 规格: 0.1ml
LAIR-1/CD305 白细胞相关球蛋白样受体1抗体 规格: 0.2mlF1 protein (YERSINIA PESTIS) 鼠疫F1蛋白/鼠疫耶尔森氏荚膜抗原F1单克隆抗体 规格: 0.1ml
Mouse Anti-Rabbit IgM/PE-Cy7 PE-Cy7标记的小鼠抗兔IgM 规格: 0.1ml