操作步骤:
1.标准品的稀释:本人热休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)elisa试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.
10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
参数规格:
产品名称:人热休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)elisa试剂盒
英文名称:Human Heat Shock Protein glycoprotein 96, HSP gp96 Elisa Kit
规格:96T/48T
货号:GOY-1184E
保存条件:2-8℃低温保存
试剂盒组成及试剂配制 :
1. 酶联板(Assay plate ):一块(96孔)。
2. 标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3. 样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4. 标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:10 0)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9. 浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10. 终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
细胞/组织活性高尔基体分离试剂盒 10次
细胞/组织高质纯化高尔基体分离试剂盒 10次
分离高尔基体纯度双法(GT/NCR)检测试剂盒 20次
细胞膜流动性(fluidity)荧光检测试剂盒 20次
血红细胞溶解液 500毫升
陈旧血红细胞溶解液 500毫升
血红细胞直接溶解液 500毫升
白细胞冻存试剂盒 50次
EB病毒介导永生化细胞克隆试剂盒 10次
血白细胞分离试剂盒 1050/100次
单核白细胞/细胞分离试剂盒 10次
多核白细胞分离试剂盒 10次
人热休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)elisa试剂盒nitrocellulose filter membrane(AMersham) NC膜(0.45μm) 30cm*3m
ECL Western Blotting Detection Kit(Mouse/Rabbit IgG) 化学发光法检测试剂盒(小鼠/兔IgG) 1盒
3-Amino-9-Ethylcarbazole AEC(过氧化物酶显色底物) 5g
NON-Fat Powdered Milk;Difco Skim Milk 脱脂奶粉 10g|100g|500g
Metal Enhanced DAB Substrate Kit,20× 增强型DAB显色试剂盒(20×) 3ml|10ml
显影液(柯达) 20L*2
定影液(柯达) 20L*2
暗盒(8×10) 8*10
ECL Western Blotting Detection Kit(Human IgG) WB化学发光法检测试剂盒(人IgG) 1kit
SDS Solution,10% 10%SDS溶液 100ml|500ml
Denhardts solution,50× 50×Denhardts溶液 50ml
Western洗涤液 100ml|500ml