试剂盒组成及试剂配制 :
1. 酶联板(Assay plate ):一块(96孔)。
2. 标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3. 样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4. 标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:10 0)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9. 浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10. 终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
参数规格:
产品名称:人瘦素受体(LEPR) ELISA Kit
英文名称:Human Leptin Receptor, LEPR Elisa Kit
规格:96T/48T
货号:GOY-1158E
保存条件:2-8℃低温保存
操作步骤:
1.标准品的稀释:本人瘦素受体(LEPR) ELISA Kit提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.
10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
DMEM细胞培养基 500毫升
DMEM细胞培养基(无红) 500毫升
RPMI 1640细胞培养基 500毫升
胰蛋白(0.05%)乙二胺四乙酸混合液 100毫升
胰蛋白(0.25%)乙二胺四乙酸混合液 100毫升
乙二胺四乙酸(EDTA)细胞脱离溶液 100毫升
Hanks平衡盐缓冲溶液(HBSS) 500毫升
Hanks钙镁平衡盐缓冲溶液(HBSS) 500毫升
Hanks钙镁平衡盐缓冲溶液(HBSS)不含NaHCO3 500毫升
谷胺酰氨溶液(100X) 100毫升
10倍Hanks平衡盐缓冲溶液(HBSS) 500毫升
标准平衡盐(PBS)缓冲溶液 500毫升
人瘦素受体(LEPR) ELISA KitPrimary&Secondary Antibody Diluent for Imunostaining 染色用一抗二抗稀释液 100ml
Secondary Antibody Diluent for Imunostaining 染色用二抗稀释液 100ml
Primary Antibody Diluent for Imunostaining 染色用一抗稀释液 100ml
Antigen Retrieval Buffer (50×Tris-EDTA, pH 9.0) Tis-EDTA抗原修复液(50×) 100ml
Antigen Retrieval Buffer (40×Citrate-EDTA, pH 6.2) 柠檬酸钠-EDTA抗原修复液(40×) 125ml
Immunohischemistry Kit for Rabbit Primary Antibody 兔组化(IHC)检测试剂盒 150T
Immunohischemistry Kit for Mouse Primary Antibody 小鼠组化(IHC)检测试剂盒 150T
Antigen Retrieval Buffer (50×EDTA Buffer, pH 8.0) EDTA抗原修复液(50×) 100ml
Antigen Retrieval Buffer (50×Citrate Sodium Buffer, pH 6.0) 柠檬酸钠抗原修复液(50×) 100ml
AEC Peroxidase Substrate Kit for IHC (Red Color) AEC显色试剂盒红色(IHC) 1kit
DAB Peroxidase Substrate Kit for IHC (Blue Color) DAB显色试剂盒蓝色(IHC) 1Kit
DAB Peroxidase Substrate Kit for IHC (Yellow Color) DAB显色试剂盒黄色(IHC) 1Kit