操作步骤:
1.标准品的稀释:本人磷酸化乙酰辅酶A(PaCoA) ELISA Kit提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.
10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
参数规格:
产品名称:人磷酸化乙酰辅酶A(PaCoA) ELISA Kit
英文名称:Human Phosphorylated acetyl CoA, PaCoA Elisa Kit
规格:96T/48T
货号:GOY-0918E
保存条件:2-8℃低温保存
试剂盒组成及试剂配制 :
1. 酶联板(Assay plate ):一块(96孔)。
2. 标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3. 样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4. 标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:10 0)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9. 浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10. 终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
PE-Cy3标记的小鼠抗羊IgG 0.1mlMouse Anti-Goat IgG/PE-Cy3
Alexa Fluor 488标记的小鼠抗豚鼠IgG 0.1mlMouse Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 488
Alexa Fluor 350标记的兔抗牛IgM 0.1mlRabbit Anti-Bovine IgM/Alexa Fluor 350
Alexa Fluor 488标记的兔抗羊IgG 0.1mlRabbit Anti-Goat IgG/Alexa Fluor 488
Cy7标记的兔抗小鼠IgG-Fc 0.1mlRabbit Anti-mouse IgG-Fc/Cy7
Alexa Fluor 555标记的兔抗马IgG 0.1mlRabbit Anti-horse IgG/Alexa Fluor 555
胶体金标记的兔抗小鼠k链 0.5mlRabbit anti-mouse Kappa light chain/Gold
Alexa Fluor 555标记的兔抗长爪沙鼠IgG 0.1mlRabbit anti-MG IgG/Alexa Fluor 555
Alexa Fluor 488标记的驴抗豚鼠IgG 0.1mlDonkey Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 488
重组乙肝病毒核心抗原 100ugrHBcAg
脑源神经营养因子(脑衍化神经营养因子)(多肽片断抗原) 0.5mgBDNF (Brain-derived Neurotrophin factor)
人磷酸化乙酰辅酶A(PaCoA) ELISA Kit5-Iodotubercidin 腺苷激酶抑制剂(5-Iodotubercidin) 1mL(10mM)|2mg|5mg|25mg|50mg
GSK-690693 Akt抑制剂(GSK-690693) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
Sodium Butyrate 组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDAC抑制剂) 1mL(10mM)|1g|5g
Dacomitinib ERBB家族抑制剂(Dacomitinib) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
L-NAME hydrochloride NOS抑制剂(L-NAME hydrochloride) 1mL(10mM)|100mg|500mg
SKF-96365 hydrochloride SOCE抑制剂 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
WP1066 JAK2和STAT3抑制剂(WP1066) 1mL(10mM)|10mg|50mg
EPZ004777 DOT1L抑制剂(EPZ004777) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
Abiraterone CYP17抑制剂(Abiraterone) 10mg|50mg|100mg|200mg|500mg|1g|2g|5g
Zebularine DNA甲基转移酶抑制剂(胞苷脱氨酶抑制剂)(Zebularine) 1mL(10mM)|10mg|50mg
Forodesine hydrochloride 嘌呤核苷磷酸化酶抑制剂(PNP抑制剂)(Forodesine盐酸盐) 1mL(10mM)|1000ug|2500ug|5mg|10mg
GSK2879552 LSD1抑制剂(GSK2879552) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg