特点:
1. 即开即用,用户只需要提供病毒样品。
2. 根据鲍疱疹样病毒保守序列设计的专一性引物,与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量 PCR 检测,避免后续污染。
5. 本试剂盒足够 50 次 20μL 反应体系的荧光定量 PCR。
6. 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。
产品名称 |
规格 |
货号 |
齿垢密螺旋体PCR检测试剂盒 |
50T |
GOY-M1083 |
组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
苯丙氨酸脱氨酶 Phenylalanine Deaminase Medium 1ml*20
伊红美蓝琼脂(EMB) Eosin-Methylene Blue Agar 250g
Kovacs氏靛基质试剂盒 Kovacs's indole Box 5ml*2
甲基红指示剂盒 Methyl Red Indicator Box 5ml*2
哥伦比亚MUG培养基 Columbia- MUG Medium 250g
BDS培养基 BDS Medium 250g
葡萄糖琼脂 Dextrose Agar 250g
Andrade氏糖类肉汤 Andrade’s Carbohydrate Broth 250g
Korser氏枸椽酸盐肉汤 Korser Citrate Sodium Broth 100g
Endo培养基 Endo Agar 250g
乳糖莫能霉素葡萄糖醛酸琼脂 LMG Agar 250g
Tergitol-7琼脂 Tergitol-7 Agar 250g
A1培养基 A1 Medium 250g
LesEndo琼脂 m-Endo Agar,LES 250g
齿垢密螺旋体PCR检测试剂盒细胞分裂周期相关蛋白4抗体 规格: 0.1ml 英文名称: CDCA4
8号染色体开放阅读框70抗体 规格: 0.2ml 英文名称: C8orf70
细胞内氯离子通道蛋白4抗体 规格: 0.1ml 英文名称: CLIC4
CD163蛋白样1抗体 规格: 0.1ml 英文名称: CD163L1
CD98轻链抗体 规格: 0.1ml 英文名称: SLC7A5
轴突蛋白4/少突胶质细胞抗体 规格: 0.2ml 英文名称: CASPR
促肾上皮质释放因子抗体 规格: 0.1ml 英文名称: CRF
细胞死亡同源蛋白6抗体 规格: 0.1ml 英文名称: CED6
CTBS蛋白抗体 规格: 0.2ml 英文名称: CTBS
8号染色体开放阅读框74抗体 规格: 0.2ml 英文名称: C8orf74
酯酶抑制蛋白C1IN抗体 规格: 0.2ml 英文名称: C1 Inactivator
传真号码:021-39596320 021-39921927
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产品均为实验试剂,仅供科研实验使用,非药品、非食品、不可用于动物及人体!