使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。
产品名称
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规格
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货号
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本迪布焦型埃博拉病毒PCR检测试剂盒
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50T
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GOY-M0203
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特点:
1. 即开即用,用户只需要提供病毒样品。
2. 根据鲍疱疹样病毒保守序列设计的专一性引物,与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量 PCR 检测,避免后续污染。
5. 本试剂盒足够 50 次 20μL 反应体系的荧光定量 PCR。
6. 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
Methyl Green 甲绿1g瓶大鼠脂肪型脂肪酸结合蛋白(FABP)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Agarose L.M.P 低溶点琼脂糖2.5g瓶人肾损伤分子1(Kim-1)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
trans-Ferulic acid 反式阿魏酸10g瓶猪球蛋白E(IgE)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Magnoflorine chloride 木兰花碱8827320mg人苯并吡-DNA(PAH-DNA)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
0.1% Peptone Water Solution Medium 0.1%蛋白胨水溶液培养基250g瓶兔子脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Mulberroside A 桑皮苷A102841-42-920mg大鼠前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Tanshinone ⅡA 丹参酮ⅡA568-72-920mg人磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PCK)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
碱性蛋白酶(1:200000)100G瓶小鼠血小板衍生生长因子可溶性受体α(PDGFsR-α)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
透析袋 扁宽18 截留分子量100000.5m/即用型管人B-细胞趋化因子1(BLC-1/CXCL13)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
1M Hepes(pH7.2-7.4)100ml瓶人周期素依赖性激酶6(CDK-6)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Oridonin 冬凌草甲素28957-04-220mg大鼠干细胞因子受体(SCFR)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
(-)-Sparteine sulfate pentahydrate 五水合硫酸司巴丁155627820mg人巨细胞病毒(CMV)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
本迪布焦型埃博拉病毒PCR检测试剂盒胆固醇?;泼?/span>1抗体 规格: 0.2ml 英文名称: ACAT1
肌动蛋白结合蛋白LIM3抗体 规格: 0.2ml 英文名称: ABLIM3
活化转录因子4抗体 规格: 0.1ml 英文名称: ATF4
载脂蛋白C2抗体 规格: 0.2ml 英文名称: Apolipoprotein CII/APOC2
AGXT2L2蛋白抗体 规格: 0.2ml 英文名称: AGXT2L2
AFP4b蛋白抗体 规格: 0.2ml 英文名称: AFP4b
拟南芥ACA11抗体 规格: 1ml 英文名称: ACA11
溴脱氧尿苷单克隆抗体(增殖标志物) 规格: 0.1ml 英文名称: BrdU (A7)
骨/软骨蛋白多糖1抗体 规格: 0.2ml 英文名称: Biglycan
红细胞阴离子交换蛋白1抗体 规格: 0.1ml 英文名称: Band3
神经母细胞瘤相关蛋白ARID3B抗体 规格: 0.2ml 英文名称: BDP