散鳞镜鲤尾鳍细胞细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,货号16000-044),15%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。**天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。产品仅用于科研
香草酸 Vanillic acid 121-34-6
香叶木苷 Diosimin 520-27-4
香蜂草苷 Didymin 14259-47-3
香叶木素-7-O-葡萄糖苷 Diosmetin-7-O-β-D-glucopyranoside 20126-59-4
新乌头原碱 Mesaconine 6792/9/2
续断苷A Dipsanoside A
续断苷B Dipsanoside B
新蛇床内酯 Neocnidilide 6415-59-4
亚麻木酚素(SDG) Secoisolariciresinol Diglucoside 148244-82-0
延胡索乙素 Tetrahydropalmatine 10097-84-4
延龄草苷 Trillin 14144-06-0
岩白菜素 Bergenin 477-90-7
盐酸巴马汀 Palmatine chloride 10605-02-4
盐酸黄柏碱 Phellodendrine chloride 104112-82-5
盐酸黄连碱 Coptisine hydrochloride 6020-18-4
盐酸去氢骆驼蓬碱 Harmine.HCL 343-27-1
盐酸石蒜碱 Lycorine Hydrochloride 2188-68-3
盐酸拓扑替康 Topotecan HCl 119413-54-6
盐酸小檗胺 Berbamine Hydrochloride 6078-17-7
盐酸小檗碱 Berberine Hydrochloride 633-65-8
盐酸药根碱 Jatrorrhizine Hydrochloride 6681-15-8
盐酸伊立替康 Irinotecan HCL 64439-81-2
盐酸育亨宾 Yohimbine Hydrochloride 65-19-0